أسس كيمياء الأنسجة الهستوكمستري النظري والعملي
يتناول هذا الكتاب الحديث عن إعداد التحضيرات (العينات) الهستوكيميائية للفحص الميكروسكوبي، والأسس النظرية للتثبيت الهستوكيميائي، والمكونات الهستوكيميائية ...
الكيمياء النسيجية ـ الكيمياء في سياق الأنسجة البيولوجية ـ هي مجموعة لا تقدر بثمن من التقنيات المستخدمة لتصور الهياكل البيولوجية. ويقع هذا المجال على الواجهة بين الكيمياء العضوية والكيمياء الحيوية وعلم الأحياء. وقد سمح تكامل هذه التخصصات على مدى القرن الماضي بتصوير الخلايا والأنسجة باستخدام المجهر. واليوم، من خلال استغلال البيئات الكيميائية الفريدة داخل الخلايا، وتقنيات التعبير غير المتجانسة، والنشاط الأنزيمي، يمكن استخدام الأساليب الكيميائية النسيجية لتصور الهياكل في المادة الحية. وتركز هذه المراجعة على تقنيات الوسم والفلوروفورات العضوية المستخدمة في الخلايا الحية.
الهدف من علم الكيمياء النسيجية هو توفير اللون والتباين للصور المجهرية. يستخدم هذا المجال تقنيات مختلفة لإنجاز وضع العلامات المحددة للهياكل البيولوجية. كان علماء الكيمياء النسيجية رائدين في استخدام البقع الخلوية الجزيئية الصغيرة والجزيئات الموسومة مثل الأجسام المضادة والكشف بوساطة الإنزيمات وتضخيم الإشارة . ومع ذلك، كان علم الكيمياء النسيجية مرادفًا تاريخيًا لتصوير الخلايا والأنسجة الثابتة (أي الميتة). أدى ظهور تقنيات التلاعب الجيني إلى توسيع نطاق الأساليب الكيميائية النسيجية إلى حد كبير لتشمل الخلايا الحية. تدرس هذه المراجعة المجموعة الحالية من استراتيجيات وضع العلامات وتناقش الأصباغ الفلورية المترابطة التي تسمح لعلماء الأحياء بإضافة اللون إلى الأنظمة الحية.
تحدث عملية الفلورسنت عندما يمتص الصبغ فوتونًا واحدًا أو أكثر، مما ينتج عنه جزيء في حالة مثارة . يمكن لهذا الجزيء المثار أن يسترخي من خلال مجموعة متنوعة من العمليات، بما في ذلك انبعاث فوتون بطول موجي آخر، عادةً ما يكون أطول. هذه الخاصية - انبعاث فوتون بطول موجي مختلف - هي التي تسمح باكتشاف الفلوروفورات في وجود مليارات الجزيئات الأخرى في عينة بيولوجية. وبالتالي، فإن التقنيات القائمة على الفلورسنت تجد فائدة واسعة النطاق في البحث البيولوجي لأنها توفر حساسية وتباينًا رائعًا في تجارب التصوير .
تأتي الجزيئات الفلورية بأشكال مختلفة، بما في ذلك الأصباغ الجزيئية الصغيرة التي يمكن الوصول إليها من خلال الكيمياء العضوية ، والبروتينات الفلورية المشفرة وراثيًا ، أو "النقاط الكمومية" غير العضوية . هنا، نركز على فئات الفلوروفور العضوية، والتي تشمل كل من الأصباغ الجزيئية الصغيرة الاصطناعية والبروتينات الفلورية. المبدأ الأساسي لفهم الفلوروفور العضوي هو الوحدات النمطية. يسمح بناء بدائل مختلفة في البنية الجزيئية للصبغة وحولها بضبط أقصى درجات الإثارة (λex) وأقصى درجات الانبعاث (λem) عبر الطيف المرئي بالكامل وفي كل من الأشعة فوق البنفسجية والأشعة تحت الحمراء
-------------
--------------------------